試劑配制:
1、酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人衰變加速因子英文名稱:Human DAF ELISA Kit產品別名:人DAF/CD55 elisa試劑盒用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。
產品名稱 | 人衰變加速因子ELISA試劑盒 |
英文名稱 | Human DAF ELISA Kit |
貨號 | CS-E3998 |
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過一夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4. 細胞培養物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
以下是公司正在熱銷的產品:
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細胞結構型神經元一氧化氮合成酶(cNOS//nNOS)活性熒光定量檢測試盒mouse MMP-9 小鼠血清金屬基質蛋白酶-9
組織結構型神經元一氧化氮合成酶(cNOS//nNOS)活性熒光定量檢測試盒RANTES 小鼠趨化因子
血液結構型神經元一氧化氮合成酶(cNOS//nNOS)活性熒光定量檢測試盒G-CSF 小鼠粒細胞-集落刺激因子
體液結構型神經元一氧化氮合成酶(cNOS//nNOS)活性熒光定量檢測試盒GM-CSF 小鼠粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子
細胞誘導型巨噬細胞一氧化氮合成酶(iNOS /NOS2/mNOS)活性熒光定量檢測試盒M-CSF 小鼠巨噬細胞-集落刺激因子
組織誘導型巨噬細胞一氧化氮合成酶(iNOS /NOS2/mNOS)活性熒光定量檢測試盒LIF 小鼠白血病抑制因子
血液誘導型巨噬細胞一氧化氮合成酶(iNOS /NOS2/mNOS)活性熒光定量檢測試盒IGF-1 小鼠胰島素樣生長因子-1
體液誘導型巨噬細胞一氧化氮合成酶(iNOS /NOS2/mNOS)活性熒光定量檢測試盒IGF- II 小鼠胰島素樣生長因子-Ⅱ
細胞結構型內皮細胞一氧化氮合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性熒光定量檢測試盒ICAM- I 小鼠細胞間粘附因子-ⅠBovine BNP(Brain Natriuretic Peptid) ELISA Kit
Bovine BNP(Brain Natriuretic Peptid) ELISA KitC1orf222英文名稱:BAIAP2L2人新喋呤(NEOP)免疫試盒
化學,固相合成, 原三酯
phospho-STAT1 (Ser727)英文名稱:phospho-Tau protein(Ser552)谷胱甘肽過氧化酶3
C2orf15英文名稱:Phospho-Bad (Ser136)人鋅轉運蛋白6(ZnT6)免疫試盒
化學,固相合成, 2--5-
SDCG1英文名稱:phospho-Tau protein(Thr529)谷胱甘肽過氧化酶4抗體
CKAP4英文名稱:Phospho-Bad (Ser155)人鋅轉運蛋白4(ZnT4)免疫試盒 ZNF81英文名稱:TAS2R16慢性粒細胞白血病33體
化學,固相合成, 1,1,2,2-四-2,2,3,3-四
Smad3英文名稱:phospho-Tau protein(Thr522)高爾基體膜蛋白GP73抗體
注意事項:
1.使用前請保存在2-8℃。復溶后的標準品若未用完,請廢棄。
2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置,會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結晶,屬于正?,F象,微加熱至40℃使結晶*溶解后再配制洗滌液。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應終止液除外)。
5. 充分輕微混勻對反應結果尤為重要,使用微量振蕩器,如無微量振蕩器,可在反應孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗結果。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液標本時,請按國家生物試驗室安全防護條列執行。
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